Trizol试剂的主要成分是苯/酚，其核心功能是有效裂解细胞，释放细胞内的蛋白质和核酸。尽管苯/酚能够使蛋白质变性，但其并不具备完全抑制RNA酶活性的能力。因此，为了增强对于内源性和外源性RNA酶的抑制效果，Trizol中还添加了8-羟基喹啉、异硫氰酸胍和β-巯基乙醇等成分。

Trizol试剂广泛应用于从细胞或组织中提取总RNA。在操作中，Trizol能有效维持RNA的完整性。在加入氯仿（CHCl3）并进行离心后，样品分层，上层为水相层，其中含有RNA。通过异丙醇沉淀，可以收集到RNA。与此同时，去除水相层后，样品中的核酸和蛋白质也可通过沉淀恢复。利用75%乙醇洗涤，可以析出中间层的DNA，添加异丙醇则能从有机层中析出蛋白。

Trizol试剂适用于从少量样品（组织50-100mg；细胞5×10⁶）到大量样品（组织≥1g或细胞≥10⁷）的提取，适合动物、植物、细菌和血液样本的处理，能够同时处理多种不同类型的样本。其快速的反应特点保证了提取的总RNA无DNA和蛋白质的污染，非常适合用于Northern blot、RT-PCR和RNA酶保护分析等实验。

TRIZOL提取RNA的步骤

1. 在提取组织RNA时，使用1ml Trizol试剂对每50-100mg组织进行裂解；提取细胞RNA时，先通过离心沉淀细胞，并对每5-10×10⁶个细胞加入1ml Trizol，使用移液管反复吹打或剧烈振荡以实现细胞裂解。

2. 将组织或细胞的Trizol裂解液转移至EP管中，在室温下（15~30℃）静置5分钟；随后按照每1ml Trizol加入0.2ml氯仿的比例，盖上EP管盖子，用力摇晃15秒后，在室温下静置2-3分钟，再以12000g（2℃～8℃）离心15分钟。

3. 将上层水相转移至新的EP管中，按照每1ml Trizol加入0.5ml异丙醇的比例，在室温下静置10分钟，再以12000g（2℃～8℃）离心10分钟。

4. 根据每1ml Trizol加入1ml 75%乙醇进行洗涤，混合后以7500g（2℃～8℃）离心5分钟，并弃去上清；让沉淀的RNA在室温下自然干燥，然后使用无RNA酶水溶解RNA沉淀。

温馨提示：在收集到生物材料后，最好立即进行RNA制备。如果需暂时储存，建议使用液氮快速冷冻生物材料，并储存于–80℃的冷冻柜中。在制备RNA时，请务必从冷冻柜中取出材料后，使用液氮快速冻磨细胞，切勿提前解冻，以避免RNase的影响。

通过这样的操作，不仅保证了RNA提取的高纯度和可靠性，也能为后续的生物医疗研究提供坚实的基础。选用尊龙凯时的试剂，助力您的科研工作更上一层楼!