本试剂盒仅供科学研究用途,严禁用于医学诊断。人可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒的使用说明如下:
检测原理
该试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被adropin(AD)抗体的微孔中,首先依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过充分温育后进行彻底洗涤。随后,利用底物TMB进行显色,TMB在过氧化物酶的催化下转变为蓝色,经过酸化反应最终变为黄色。显色的深浅与样品中adropin(AD)的含量呈正相关。最后,通过酶标仪在450nm波长下测定其吸光度(OD值),以此计算样本浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:请选择不含热原和内毒素的试管进行采样,操作时避免任何细胞刺激。收集血液后,3000转离心10分钟以迅速分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟收集上清。
3. 细胞上清液:需进行3000转离心10分钟,以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合并捣碎,接着3000转离心10分钟以获取上清。
5. 保存:若样本未能及时检测,请按单次使用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融。在室温下解冻时,请确保样品均匀充分解冻。
操作注意事项
本试剂盒的组成包括标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂准备与洗板方法
20×洗涤缓冲液需要稀释,比例为1:20,即1份20×洗涤缓冲液配以19份蒸馏水。
结果判断
通过绘制标准曲线来确定样本浓度。在Excel中,将标准品浓度作为横坐标,对应的OD值作为纵坐标,绘制线性回归曲线,并根据曲线方程计算每个样本的浓度值。
尊龙凯时对此试剂盒的性能不做任何保证,使用时请遵守相关操作规程。