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尊龙凯时A549人肺癌细胞研究

发布时间:2025-07-28   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时细胞系培养条件:气相环境为95%空气与5%二氧化碳,培养温度设置为37℃。该细胞系源于1972年由GiardDJ通过肺癌组织移植建立,来自一名58岁白人男性。A549细胞系通过胞苷二磷脂酰胆碱途径合成富含不饱和脂肪酸的卵磷脂,且具有角蛋白阳性特征。A549是一种经典的人肺腺癌细胞系,由美国典型培养物保藏中心(ATCC)于1972年从一名肺腺癌患者的胸腔积液中分离而成,目前广泛应用于肺癌研究、药物开发及相关分子机制的探讨。

尊龙凯时A549人肺癌细胞研究

尊龙凯时传代方法首选1:2的比例进行,建议在两天后更换培养液。购买时,建议同时选择培养基产品,可以享受优厚的折扣。收到细胞后,请务必处理至良好状态后再加满培养液并封好瓶口,确保细胞运输安全。请在开瓶前检查看细胞名称是否正确,培养瓶无破损或泄漏等异常情况。如无异常,观察细胞生长情况并拍照记录(推荐40x, 100x, 200x倍镜下各一张),前三天的照片为重要售后依据,若未提供照片则默认为状态良好。

贴壁细胞传代步骤如下:首先弃去培养上清,用不含钙、镁的PBS润洗细胞1-2次;然后添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中,置于37℃下消化1-2分钟,观察细胞变化,若细胞大部分变圆并脱落,及时终止消化并添加5ml以上完全培养基。轻轻吹打细胞使其完全脱落后吸出悬液,转移至15ml离心管中,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液并重悬细胞于1-2ml完全培养基中。随后按1:2比例分瓶传代(两个T25瓶),补充新的培养基至5-8ml/瓶,最后放入37℃、5% CO2培养箱中继续培养。

对于悬浮细胞,传代步骤可按以下方法进行:采用半换液法时,将培养瓶竖直静置1小时,轻轻吸掉约3ml培养基,补充3ml新完全培养基;如需分瓶可将细胞悬液收集至离心管,1000rpm离心5分钟,弃去上清,再补充1-2ml培养液重悬后按1:2的比例分到新T25瓶中。

细胞冻存步骤为:当细胞生长至覆盖培养瓶80%面积时,弃去培养液,用PBS洗涤;添加0.25%胰蛋白酶消化液,观察至细胞收缩变圆后添加5ml完全培养液终止反应,轻轻吹打细胞并转移至离心管中,离心后弃去上清,加入1ml无血清冻存液,混匀后注入冻存管。在-80℃冰箱中储存,若需转液氮罐中,需先在冰箱中存放24小时以上。

细胞复苏步骤:取出冻存管后迅速放入37℃水浴解冻,清洗冻存管外壁后将细胞转移至含5ml培养基的离心管中,离心5分钟,去上清后重悬于5ml培养基,然后移至T25培养瓶中,置于37℃、5% CO2培养箱中继续培养,第二天更换新鲜培养基。

注意事项:部分细胞在运输过程中可能发生脱落,属正常现象。如发生较多脱落,可将培养液收集至离心管中处理,确保细胞健康。同时,若在细胞搬运过程中遇到异常情况(如丢失或污染),请及时联系尊龙凯时进行处理。

有关细胞问题的责任判定,若发生细胞丢失、瓶身破损、培养液漏液等情况,需及时重发;对于收到后48小时内发现的污染问题,需提供实验结果以便确认责任再做重发处理。若出现活性下降等情况,也需在一定时间内反馈,并提供相应照片。对于因客户不当操作造成的问题,如细胞状态不良,则不支持重发。细节问题视具体情况处理。

调试模板:af6aff.html